關(guān)鍵詞:發(fā)酵工程、大腸桿菌菌種、大腸桿菌自溶現(xiàn)象、發(fā)酵罐感染噬菌體、發(fā)酵染菌解決方案
發(fā)酵中大腸桿菌自溶的現(xiàn)象及影響因素
一、摘要
在發(fā)酵工業(yè)中,大腸桿菌作為一種重要的微生物菌種,被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)各種生物制品。然而,在發(fā)酵過(guò)程中,大腸桿菌自溶的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生,這可能導(dǎo)致發(fā)酵過(guò)程的不穩(wěn)定和產(chǎn)品質(zhì)量的下降。本文旨在探討發(fā)酵中大腸桿菌自溶的現(xiàn)象,以及噬菌體和非噬菌體引起自溶的因素,并特別介紹奧克泰士(Oxytech)德國(guó)微生物控制專(zhuān)家及消毒技術(shù)在預(yù)防和控制大腸桿菌自溶方面的應(yīng)用。
二、大腸桿菌工業(yè)化生產(chǎn)的基本形式
大腸桿菌工業(yè)化生產(chǎn)的基本形式主要包括高密度發(fā)酵和基因工程菌的構(gòu)建。高密度發(fā)酵是通過(guò)優(yōu)化培養(yǎng)條件,使大腸桿菌在較短的時(shí)間內(nèi)達(dá)到較高的密度和產(chǎn)量。而基因工程菌的構(gòu)建則是通過(guò)基因工程技術(shù),將目標(biāo)基因?qū)氪竽c桿菌中,使其表達(dá)并生產(chǎn)所需的蛋白質(zhì)或代謝產(chǎn)物。這兩種方式都為大腸桿菌的工業(yè)化生產(chǎn)提供了重要的基礎(chǔ)。
三、發(fā)酵中大腸桿菌自溶的現(xiàn)象
在發(fā)酵過(guò)程中,大腸桿菌自溶是指大腸桿菌菌體自行死亡并破裂的現(xiàn)象。這種現(xiàn)象常常導(dǎo)致菌種整體生長(zhǎng)速度過(guò)慢以及菌種發(fā)酵量的不足,從而嚴(yán)重影響項(xiàng)目的進(jìn)程。
3.1噬菌體引起大腸桿菌自溶的因素
噬菌體是導(dǎo)致大腸桿菌自溶的一個(gè)重要因素。噬菌體主要通過(guò)寄生于菌體中,并依靠菌種自身的合成途徑合成自帶噬菌體,或者依靠本身的分裂增殖途徑利用菌體的合成組分進(jìn)行增殖。待繁殖的噬菌體成熟后,它們會(huì)壓迫菌體,導(dǎo)致其破裂釋放更多的噬菌體,并重復(fù)上述過(guò)程。鑒于噬菌體驚人的增殖速度以及其本身簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu)帶來(lái)的存活性,一旦發(fā)生噬菌體感染,務(wù)必停止產(chǎn)線運(yùn)行進(jìn)行消殺,并將產(chǎn)線暫存15日以上,以確保消滅噬菌體避免其擴(kuò)散。
3.2非噬菌體引起大腸桿菌自溶的因素
非噬菌體引起大腸桿菌自溶的因素有多種,主要包括:
代謝產(chǎn)物:如多粘菌素B Sub-MICs等。研究發(fā)現(xiàn),隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),多粘菌素B Sub-MICs會(huì)導(dǎo)致大腸桿菌淡染程度加重、活菌數(shù)量減少、電鏡下細(xì)菌胞壁缺損甚至破壞,內(nèi)容物或部分喪失。
外源蛋白質(zhì)表達(dá)與大腸桿菌宿主自身的脅迫應(yīng)激機(jī)制:在生物反應(yīng)器中表達(dá)ScFv大腸桿菌細(xì)胞自溶的分析中發(fā)現(xiàn),外源蛋白高效表達(dá)并積累在細(xì)胞內(nèi),可能導(dǎo)致大部分活細(xì)胞較野生菌提前進(jìn)入活著但不可培養(yǎng)(VBNC)狀態(tài),進(jìn)而發(fā)生細(xì)胞自溶。
四、奧克泰士在預(yù)防和控制大腸桿菌自溶中的應(yīng)用
奧克泰士(Oxytech)是一種高效的消毒劑,具有廣譜殺菌、無(wú)刺激性和環(huán)境友好等特點(diǎn)。在發(fā)酵工業(yè)中,奧克泰士可以用于預(yù)防和控制大腸桿菌自溶。具體而言,奧克泰士可以:
殺滅噬菌體:奧克泰士具有強(qiáng)大的殺菌能力,可以有效殺滅大腸桿菌中的噬菌體,減少噬菌體對(duì)發(fā)酵過(guò)程的影響。
降低代謝壓力:通過(guò)優(yōu)化發(fā)酵條件,如添加適量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)整培養(yǎng)溫度等,可以降低大腸桿菌的代謝壓力,減少自溶現(xiàn)象的發(fā)生。奧克泰士的使用可以與這些優(yōu)化措施相結(jié)合,提高發(fā)酵過(guò)程的穩(wěn)定性。
抑制外源蛋白質(zhì)表達(dá):對(duì)于需要在大腸桿菌中表達(dá)外源蛋白質(zhì)的情況,奧克泰士可以通過(guò)降低外源蛋白質(zhì)的表達(dá)量或改善蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)等方式,減少其對(duì)細(xì)胞的毒性作用,降低自溶現(xiàn)象的發(fā)生。
大腸桿菌自溶是發(fā)酵工業(yè)中常見(jiàn)的問(wèn)題,它可能由噬菌體感染、代謝產(chǎn)物、外源蛋白質(zhì)表達(dá)和環(huán)境因素等多種因素引起。為了預(yù)防和控制大腸桿菌自溶,需要采取綜合性的措施,包括使用奧克泰士等高效的消毒劑、優(yōu)化發(fā)酵條件、降低代謝壓力等。這些措施可以提高發(fā)酵過(guò)程的穩(wěn)定性和效率,保證產(chǎn)品質(zhì)量。