① 菌種本身帶噬菌體,特別是溶源性噬菌體,對(duì)這種菌種,一經(jīng)發(fā)現(xiàn),應(yīng)立即棄去② 發(fā)酵車間環(huán)境里噬菌體隨空氣進(jìn)入發(fā)酵罐污染。盡管發(fā)酵罐有空氣過(guò)濾器,但如果環(huán)境空氣存在噬菌體,空氣過(guò)濾器無(wú)法過(guò)濾攔截,從空氣過(guò)濾原理得知只能攔截一部分的噬菌體。③ 罐體、管道清洗消毒不到位,或時(shí)間久了存在管道頑固性生物膜給予的再次污染。
① 精度為0.01um的空氣過(guò)濾器能阻攔噬菌體空氣。過(guò)濾器中的0.01um的精度不是單指膜的精度,他是把布朗運(yùn)動(dòng)、撞擊等攔截都計(jì)算在內(nèi)的,故0.01um只是個(gè)相對(duì)精度,實(shí)際上膜的絕對(duì)精度在0.2um左右,故0.01um的空氣過(guò)濾器可以擋住一部分噬菌體,但不能擋住。用過(guò)濾器的洗脫液經(jīng)電鏡觀察,可以看到噬菌體的存在。
② 噬菌體不耐熱,65℃以上的溫度可殺死噬菌體。我們所說(shuō)的熱滅菌是指達(dá)到一定的溫度并維持一定的時(shí)間,使微生物致死的過(guò)程,可在實(shí)際生產(chǎn)中我們經(jīng)常會(huì)遇到溫度達(dá)到了使噬菌體致死的溫度,可是卻殺不死噬菌體,主要原因在于維持時(shí)間不夠。這就很容易解釋為什么空氣在進(jìn)罐前就已經(jīng)加熱到70C,可噬菌體仍然能活著進(jìn)罐。
③ 噬菌體對(duì)藥物敏感。甲醛等消毒劑可殺死噬菌體原理同上,雖然藥的濃度和劑量足夠,可是如果維持時(shí)間不夠仍起到不殺菌效果。用5%的甲醛對(duì)全廠區(qū)噴灑,而后在環(huán)境中取樣測(cè)定,仍有很多活噬菌體。
① 每次上罐前對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行空氣試漏處理,防止由于設(shè)備原因造成活菌的外泄和噬菌體的進(jìn)入。
② 在接完種后,必須對(duì)殘余種子液、接種瓶、種子罐及其連接管道附件等用蒸汽或藥物消毒,沒(méi)經(jīng)過(guò)滅活處理的種子液不得排入污水池。
③ 在發(fā)酵過(guò)程中,需要知道細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,要求定時(shí)取樣對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行檢測(cè)分析。取樣最好在無(wú)風(fēng)的條件下進(jìn)行,取樣口下方需設(shè)一個(gè)裝有堿液((pH≥11)的容器,除了加蓋取樣瓶中的料液外,其余料液必須全部進(jìn)入該堿容器,切勿噴灑或直接進(jìn)入下水道。取完樣后,要用消毒水對(duì)取樣者的手、取樣瓶、裝堿容器和以取樣品為中心的上下左右1m的空間進(jìn)行立體的噴灑;取樣瓶需裝在盛有消毒水的容器中直到化驗(yàn)室。
① 加強(qiáng)環(huán)境消毒:車間內(nèi)部用漂白水和新潔爾滅輪流對(duì)所有地面角落進(jìn)行噴灑,定點(diǎn)放置固體二氧化氯,使車間內(nèi)部能聞到淡淡的藥味。每天早晚一次對(duì)車間地溝用漂白粉消毒,保持地溝內(nèi)清潔無(wú)積水。車間周圍用二氧化氯、漂白粉每天噴灑2次。
② 加強(qiáng)普查力度:定期(3天1次) 對(duì)車間內(nèi)部和車間周圍環(huán)境中的雜菌含量進(jìn)行普查統(tǒng)計(jì),重點(diǎn)部位要求每天普查,對(duì)測(cè)得不合格的區(qū)域進(jìn)行重點(diǎn)消毒,并且分析雜菌的來(lái)源。定期檢測(cè)噬菌體案例與檢測(cè)空氣中噬菌體的方法。